EndoFree Plasmid Mega Kit (5) 货号:12381

EndoFree Plasmid Mega Kit (5) 货号:12381

EndoFree Plasmid Mega Kit (5)

货  号:12381

产品规格:5

原  产  地:德国

参考价格:4560 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

EndoFree Plasmid Mega Kit (5)

12381

纯化得到至多2.5 mg无内毒素超转染级纯质粒或柯斯质粒DNA

  • 得到的DNA内毒素低于0.1 EU/µg
  • 纯化流程快,同时去除内毒素
  • 获得高产量高拷贝质粒DNA
  • 使用LyseBlue,获得最佳的裂解和高产量的DNA

EndoFree Plasmid Kit基于阴离子交换技术,可快速制备不含内毒素的质粒DNA。QIAfilter Cartridges通过过滤快速澄清裂解液,DNA产量至多500 μg(Maxi)、2.5 mg(Mega)和10 mg(Giga)。制备的 DNA纯度超过两次CsCl梯度离心法所得DNA的纯度,非常适合超转染级纯的应用。

原理

纯化的质粒DNA内毒素污染水平取决于所用的纯化方法。硅胶技术纯化的DNA具有 非常高的内毒素水平。QIAGEN、QIAfilter、HiSpeed Plasmid Kits和两次CsCl超速离心可获得相对低水平内毒素的纯DNA。EndoFree Plasmid Buffer Set包含完整的内毒素去除步骤,获得<0.1 EU/µg的质粒DNA。

QIAfilter、HiSpeed和EndoFree Plasmid Kits提供的QIAfilter Cartridges是特殊设计的过滤装置,用于代替细菌细胞碱裂解后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可完全去除SDS沉淀,清除细菌裂解液,相比离心可大量节约时间,减少1小时的质粒纯化时间。QIAfilter Mega-Giga Cartridges采用内部真空的方式轻松的澄清大量的细菌裂解物。

QIAGEN-tips中独特的阴离子交换树脂(不提供EndoFree Plasmid Buffer Set)专为核酸纯化而开发。它卓越的分离性能使得DNA纯度与连续两次CsCl梯度离心获得的DNA纯度相当。由重力流驱动并持续运转的预装 QIAGEN-tips,最大限度减少手动制备质粒所需的时间。整个QIAGEN质粒纯化系统不使用有毒物质,如苯酚,氯仿,溴化乙锭和CsCl,最大限 度地减少对用户和环境的危害。

内毒素,又称脂多糖或LPS,是革兰氏阴性菌细胞膜的组成部分,如大肠杆菌(参见Bacterial cell wall)。 内毒素在质粒解裂纯化过程中释放,并显著地降低内毒素敏感的细胞株转染效率。此外,内毒素与DNA竞争“自由”转染试剂,影响转染实验。内毒素也诱导巨噬 细胞和B细胞等免疫细胞中非特异性免疫反应,从而导致转染结果的误读。这些反应包括诱导的蛋白质和脂类,如IL -1和前列腺素的合成。总体而言,内毒素在转染实验中是不可控变量,影响结果的可重复性,使它们难以对比、解读。在基因治疗研究中,内毒素可造成内毒素休 克综合症和激活补体级联,干扰研究。

操作流程

在碱性条件下,细菌细胞裂解,用QIAfilter Mega-Giga Cartridge清除粗裂解物。将Endotoxin Removal Buffer加入到过滤后的裂解液中。冰浴后,将纯净的裂解物上样到阴离子交换柱上,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA选择性结合。用中盐缓冲液清除 RNA、蛋白质、代谢产物和其他低分子量杂质,超纯质粒DNA被高盐缓冲液洗脱(参见QIAGEN Plasmid Kit procedures)。DNA由异丙醇脱盐、沉淀并且离心回收。

应用

使用EndoFree Plasmid Kits纯化的DNA适合多种敏感应用,包括:

  • 转染,包括原代、敏感和悬浮细胞
  • 基因治疗研究
  • 基因沉默
  • 显微注射

产品详细信息

EndoFree Plasmid Mega Kit (5)

12381

纯化得到至多2.5 mg无内毒素超转染级纯质粒或柯斯质粒DNA

  • 得到的DNA内毒素低于0.1 EU/µg
  • 纯化流程快,同时去除内毒素
  • 获得高产量高拷贝质粒DNA
  • 使用LyseBlue,获得最佳的裂解和高产量的DNA

EndoFree Plasmid Kit基于阴离子交换技术,可快速制备不含内毒素的质粒DNA。QIAfilter Cartridges通过过滤快速澄清裂解液,DNA产量至多500 μg(Maxi)、2.5 mg(Mega)和10 mg(Giga)。制备的 DNA纯度超过两次CsCl梯度离心法所得DNA的纯度,非常适合超转染级纯的应用。

原理

纯化的质粒DNA内毒素污染水平取决于所用的纯化方法。硅胶技术纯化的DNA具有 非常高的内毒素水平。QIAGEN、QIAfilter、HiSpeed Plasmid Kits和两次CsCl超速离心可获得相对低水平内毒素的纯DNA。EndoFree Plasmid Buffer Set包含完整的内毒素去除步骤,获得<0.1 EU/µg的质粒DNA。

QIAfilter、HiSpeed和EndoFree Plasmid Kits提供的QIAfilter Cartridges是特殊设计的过滤装置,用于代替细菌细胞碱裂解后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可完全去除SDS沉淀,清除细菌裂解液,相比离心可大量节约时间,减少1小时的质粒纯化时间。QIAfilter Mega-Giga Cartridges采用内部真空的方式轻松的澄清大量的细菌裂解物。

QIAGEN-tips中独特的阴离子交换树脂(不提供EndoFree Plasmid Buffer Set)专为核酸纯化而开发。它卓越的分离性能使得DNA纯度与连续两次CsCl梯度离心获得的DNA纯度相当。由重力流驱动并持续运转的预装 QIAGEN-tips,最大限度减少手动制备质粒所需的时间。整个QIAGEN质粒纯化系统不使用有毒物质,如苯酚,氯仿,溴化乙锭和CsCl,最大限 度地减少对用户和环境的危害。

内毒素,又称脂多糖或LPS,是革兰氏阴性菌细胞膜的组成部分,如大肠杆菌(参见Bacterial cell wall)。 内毒素在质粒解裂纯化过程中释放,并显著地降低内毒素敏感的细胞株转染效率。此外,内毒素与DNA竞争“自由”转染试剂,影响转染实验。内毒素也诱导巨噬 细胞和B细胞等免疫细胞中非特异性免疫反应,从而导致转染结果的误读。这些反应包括诱导的蛋白质和脂类,如IL -1和前列腺素的合成。总体而言,内毒素在转染实验中是不可控变量,影响结果的可重复性,使它们难以对比、解读。在基因治疗研究中,内毒素可造成内毒素休 克综合症和激活补体级联,干扰研究。

操作流程

在碱性条件下,细菌细胞裂解,用QIAfilter Mega-Giga Cartridge清除粗裂解物。将Endotoxin Removal Buffer加入到过滤后的裂解液中。冰浴后,将纯净的裂解物上样到阴离子交换柱上,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA选择性结合。用中盐缓冲液清除 RNA、蛋白质、代谢产物和其他低分子量杂质,超纯质粒DNA被高盐缓冲液洗脱(参见QIAGEN Plasmid Kit procedures)。DNA由异丙醇脱盐、沉淀并且离心回收。

应用

使用EndoFree Plasmid Kits纯化的DNA适合多种敏感应用,包括:

  • 转染,包括原代、敏感和悬浮细胞
  • 基因治疗研究
  • 基因沉默
  • 显微注射