QIAGEN PCR Cloning Kit (40) 货号:231124

QIAGEN PCR Cloning Kit (40) 货号:231124

QIAGEN PCR Cloning Kit (40)

货  号:231124

产品规格:40

原  产  地:德国

参考价格:4410 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

QIAGEN PCR Cloning Kit (40)

231124

直接克隆Taq DNA聚合酶产生的PCR产物

  • 从PCR产物到涂板只需40分钟
  • 易用的连接酶预混液
  • 高特异性UA连接和高效克隆
  • 转化细胞可立刻涂板

QIAGEN PCR Cloning Kit提供即用型连接反应,包括3’端含有U突出末端的线性克隆载体,可直接进行高效、快速的连接和克隆。

原理

pDrive Cloning Vector(参见pDrive Cloning Vector)通过UA杂交可对PCR产物进行高效克隆。载体是3’端带有U突出末端的线性形式,能与Taq和 其他非高保真DNA聚合酶产生的带有A突出末端的PCR产物进行高特异性杂交。pDrive Cloning Vector具有很多有用的特征,便于对克隆的PCR产物进行分析。这些特征包括多种独特的限制性酶切识别位点、通用测序引物位点和用于体外转录的启动 子。此外,载体还可进行氨苄青霉素和卡那霉素筛选,以及对重组克隆的蓝/白斑筛选。

PCR产物可高效克隆到pDrive Cloning Vector,与基于TA的克隆载体相比,所需时间更少。而且,T是最可能与非互补碱基(如G、C和T)杂交的碱基,带有T突出末端的载体更可能发生自连 或连接克隆引物或退火引物,导致假阳性克隆数目增加。相比而言,pDrive Cloning Vector具有更高的克隆效率,表明U对非特异性碱基配对有更低的容忍度。

Ligation Master Mix采用预混形式,专用于为高效克隆提供最佳的杂交环境。

QIAGEN PCR Cloning Kit的组成
成分 包含 浓度
pDrive Cloning Vector QIAGEN PCR Cloning Kit (40) 货号:231124 50 ng/µl
Ligation Master Mix QIAGEN PCR Cloning Kit (40) 货号:231124 2x solution
Distilled water QIAGEN PCR Cloning Kit (40) 货号:231124
QIAGEN EZ Competent Cells
SOC medium

操作流程

 直接将PCR产物和pDrive Cloning Vector及Ligation Master Mix简单混合,再将连接反应液加入到感受态细胞中进行转化。

与拓扑异构酶法、TA法、常规粘性末端和平末端克隆方法相比,QIAGEN PCR Cloning Kit操作流程更加快速。连接需要30分钟,使用QIAGEN EZ Competent Cells进行转化和涂板只需10分钟,从PCR产物到涂板的整个操作流程只需40分钟。

应用
QIAGEN PCR Cloning Kit适用于克隆任何3’端带有单独A突出末端的PCR产物。使用Taq和 其他非高保真DNA聚合酶产生的PCR产物无需任何制备,可直接进行克隆。提供高保真DNA聚合酶的试剂盒,如HotStar HiFidelity Polymerase Kit和QIAGEN LongRange PCR Kit,可产生带有A突出末端的PCR产物,非常适合直接与QIAGEN PCR Cloning Kit配合使用。

产品详细信息

QIAGEN PCR Cloning Kit (40)

231124

直接克隆Taq DNA聚合酶产生的PCR产物

  • 从PCR产物到涂板只需40分钟
  • 易用的连接酶预混液
  • 高特异性UA连接和高效克隆
  • 转化细胞可立刻涂板

QIAGEN PCR Cloning Kit提供即用型连接反应,包括3’端含有U突出末端的线性克隆载体,可直接进行高效、快速的连接和克隆。

原理

pDrive Cloning Vector(参见pDrive Cloning Vector)通过UA杂交可对PCR产物进行高效克隆。载体是3’端带有U突出末端的线性形式,能与Taq和 其他非高保真DNA聚合酶产生的带有A突出末端的PCR产物进行高特异性杂交。pDrive Cloning Vector具有很多有用的特征,便于对克隆的PCR产物进行分析。这些特征包括多种独特的限制性酶切识别位点、通用测序引物位点和用于体外转录的启动 子。此外,载体还可进行氨苄青霉素和卡那霉素筛选,以及对重组克隆的蓝/白斑筛选。

PCR产物可高效克隆到pDrive Cloning Vector,与基于TA的克隆载体相比,所需时间更少。而且,T是最可能与非互补碱基(如G、C和T)杂交的碱基,带有T突出末端的载体更可能发生自连 或连接克隆引物或退火引物,导致假阳性克隆数目增加。相比而言,pDrive Cloning Vector具有更高的克隆效率,表明U对非特异性碱基配对有更低的容忍度。

Ligation Master Mix采用预混形式,专用于为高效克隆提供最佳的杂交环境。

QIAGEN PCR Cloning Kit的组成
成分 包含 浓度
pDrive Cloning Vector QIAGEN PCR Cloning Kit (40) 货号:231124 50 ng/µl
Ligation Master Mix QIAGEN PCR Cloning Kit (40) 货号:231124 2x solution
Distilled water QIAGEN PCR Cloning Kit (40) 货号:231124
QIAGEN EZ Competent Cells
SOC medium

操作流程

 直接将PCR产物和pDrive Cloning Vector及Ligation Master Mix简单混合,再将连接反应液加入到感受态细胞中进行转化。

与拓扑异构酶法、TA法、常规粘性末端和平末端克隆方法相比,QIAGEN PCR Cloning Kit操作流程更加快速。连接需要30分钟,使用QIAGEN EZ Competent Cells进行转化和涂板只需10分钟,从PCR产物到涂板的整个操作流程只需40分钟。

应用
QIAGEN PCR Cloning Kit适用于克隆任何3’端带有单独A突出末端的PCR产物。使用Taq和 其他非高保真DNA聚合酶产生的PCR产物无需任何制备,可直接进行克隆。提供高保真DNA聚合酶的试剂盒,如HotStar HiFidelity Polymerase Kit和QIAGEN LongRange PCR Kit,可产生带有A突出末端的PCR产物,非常适合直接与QIAGEN PCR Cloning Kit配合使用。