• 扩增得到长片段PCR产物（最长至12.5 kb cDNA）
• 用于cDNA合成和长片段PCR的完整试剂盒
• 高保真酶确保低错配率
• 独特的缓冲液体系最大程度的减少PCR条件优化
• 扩增低拷贝和高GC含量模板

QIAGEN LongRange 2Step RT-PCR Kit确保高度准确和灵敏的长片段两步法RT-PCR。使用新型的高保真酶确保低错配率。完整的即用型试剂盒包含增强的病毒逆转录酶，能够使用总RNA或 mRNA作为模板，甚至低丰度模板，高灵敏度的合成全长的cDNA（长度可达12.5 kb）。

QIAGEN LongRange 2Step RT-PCR Kit是一款即用型试剂盒，将QIAGEN LongRange PCR Kit的特点和优点与高产量、全长度逆转录步骤相结合。LongRange 2Step RT-PCR Kit也包含所有后续长片段PCR所需的组分。

长片段PCR酶

LongRange PCR Enzyme Mix是一种耐高温DNA聚合酶，具有高保真性和高延伸率。与LongRange PCR Buffer相结合，LongRange PCR Enzyme Mix能可靠地扩增长达12.5 kb的cDNA（参见Highly sensitive amplification of large and rare transcripts）。使用QIAGEN Long-Range 2Step RT-PCR Kit得到的扩增产物可直接高效地克隆到TA/UA克隆载体上。

优化的缓冲体系，用于极长的PCR产物

扩增长于4 kb的PCR产物通常失败，并需要优化。失败的原因包括非特异性引物退火或欠佳的循环条件。避免DNA损伤，如DNA脱嘌呤，在扩增长PCR产物时尤其重 要，因为模板内单一的DNA损伤足以降低聚合酶效率。可用特异性缓冲液减少PCR循环过程中的DNA损伤，来稳定反应的pH值。LongRange PCR Buffer经优化用于扩增长达40 kb的PCR产物，并防止其脱嘌呤（参见Protection of DNA from excessive damage）。

LongRange RT Buffer经特别设计用于在高温下进行反转录，以提高仅有少量优化困难模板的变性。新型的RNase H淬灭剂与逆转录酶的双链结合位点弱结合，避免合成中RNA的选择性降解并和策划能够全长度cDNA（参见Full-length cDNA amplification）。

Q-Solution

QIAGEN LongRange 2Step RT-PCR Kit同样提供Q-Solution，新型的PCR添加剂通过修改DNA的熔化特性，有助于扩增困难模板。此独特的试剂提高了由高度二级结构或富含GC片 段的模板导致的欠佳的PCR反应。不同于其他常用的PCR添加剂如DMSO，Q-Solution仅用于一个工作浓度，并保证无毒和PCR纯度好。

该试剂盒提供独特的酶制定方案、新型的缓冲液方案和优化的精简实验方案确保简单的操作流程和成功的结果。由QIAGEN LongRange 2Step RT-PCR Kit确保的高灵敏度和高精确度，使其高度适用于扩增大范围靶，甚至是极低风度靶。从RT反应得到的长cDNA模板（所有靶在0.1–10 kb范围内）、极长靶（cDNA>10 kb）和富含GC片段和其他“困难”的模板可使用该试剂盒方便地得到扩增。