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REPLI-g Human Control Kit 货号：150090

发表于由

REPLI-g Human Control Kit 货号：150090

REPLI-g Human Control Kit

货　　号：150090

产品规格：

原  产  地：德国

参考价格：488 （参考价格，以实际价格为准）

优惠价格：

产品详细信息

REPLI-g Human Control Kit

150090

对微量或者珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增

  • 扩增获得10 µg DNA，产量稳定
  • 同时扩增多个基因组位点
  • 使用多重置换扩增反应获得可靠结果
  • 扩增获得的DNA适用于多种下游应用
  • 长期储存不会导致DNA降解

REPLI-g Mini Kit提供优化的试剂，利用多重置换扩增（MDA）技术，对微量或珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增（WGA）。50 μl反应体积的常规DNA产量为10 μg，产物的平均长度长于10 kb（在2 kb至100 kb之间）。独特的REPLI-g技术能够从多种类型的微量或珍贵样本中高度均一的进行全基因组扩增，起始样本包括纯化后基因组DNA、新鲜血液或或干 血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织或细胞。该方法可便利、准确的扩增基因组DNA，得到的DNA可即用于无需标记的多种下游应用，无需进行纯化或定量检测。与 基于PCR的全基因组扩增技术相比，这种方法的无错配率提高了1000倍，避免出现假阴性或假阳性结果。

原理

独特的REPLI-g技术使用创新的高保真酶Phi29聚合酶，利用多重置换扩增（MDA）技术扩增复杂的基因组DNA，并结合温和的碱变性， 均一的扩增基因组位点。REPLI-g Mini Kit的常规产量为10 µg，如需更多产量，可使用REPLI-g Midi Kit；因为这两个试剂盒的实验方案相同，反应体积也相同。反应体系构建十分简便，仅需约15分钟的手动操作时间，因此REPLI-g技术使用简便、可 靠，适用于对少量或珍贵的样本进行完全、均一的扩增。

扩增原理

REPLI-g利用等温基因组扩增，即多重置换扩增（MDA）技术：随机引物与变性DNA结合，在等温环境中，在Phi29聚合酶的作用下，进行置换合成反应。每个置换的单链作为模板，与引物结合，扩增生成高产量的DNA（参见Schematic representation of REPLI-g amplification）。Phi 29聚合酶为噬菌体衍生酶，具有3’→5’外切酶活性，准确性为Taq DNA聚合酶的1000倍。Phi29聚合酶与独特的REPLI-g缓冲液体系相配合，能够轻松的打开DNA的二级结构，如发卡结构，所以可确保在扩增过程中，聚合酶正常发挥作用。因此该技术生成的DNA片段长度可达100 kb，没有序列偏差（参见Unbiased amplification with Phi29 polymerase）。

DNA的碱变性

在酶扩增前，必须使基因组DNA变性，这通常是通过高温孵育、或在强碱性条件下进行的。REPLI-g Mini Kit采用温和的碱性环境孵育，使DNA变性，而片段化程度低，突变少。由此扩增获得的DNA十分完整，扩增的片段长，覆盖所有基因组位点和序列。使用 REPLI-g Mini Kit能够获得可靠的结果，确保在下游应用中不出现假阳性或假阴性结果。采用热变性的WGA技术会损伤模板DNA，导致扩增结果不准确（参见Effect of heat and alkaline denaturation on loci representation）。

操作流程

便利的单管操作

REPLI-g Mini Kit通过简便、高效的方法从纯化的少量基因组DNA样本或直接从全血、干血卡、白膜层、组织、培养的细胞中进行准确的全基因组扩增（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。加入裂解缓冲液使样本DNA裂解并变性，之后进行短暂孵育（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。中和后加入预混液（包括REPLI-g Mini DNA Polymerase），在30°C过夜进行等温扩增。REPLI-g扩增获得的DNA刻在–20°C长期储存（参见Consistent long-term stability）。

选择适合您实验需求的REPLI-g Kit（参见下表）。

表1. 种类丰富的REPLI-g Kits

REPLI-g Mini REPLI-g UltraFast Mini REPLI-g Midi REPLI-g Screening REPLI-g FFPE REPLI-g Mitochondrial DNA
起始样本 纯化后gDNA、血液、细胞 纯化后gDNA、血液、细胞 FFPE组织、FFPE组织中纯化得到的gDNA 纯化后gDNA
起始样本量 >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) Section (1 cm diameter, 10-40 µm thick); >100 ng gDNA >1 ng纯化后gDNA
产量（µg/反应） 10 7–10 40 8 标准产量：≤10，高产量≤40 3–5
反应时间（小时） 10–16 1.5 8–16 12–16 标准产量：4，高产量：10 8
手动操作时间（分钟） 15 15 15 15 40 15
规格 反应管 反应管 反应管 孔板 反应管 反应管

应用

REPLI-g扩增得到的DNA可用于多种下游应用，包括：

  • 使用TagMan引物/探针对的SNP基因分型
  • 基于定量PCR或PCR的突变检测
  • 二代测序
  • STR/微卫星分析
  • Sanger测序
  • RFLP和Southern印迹分析
  • 芯片技术，如比较基因组杂交

产品详细信息

REPLI-g Human Control Kit

150090

对微量或者珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增

  • 扩增获得10 µg DNA，产量稳定
  • 同时扩增多个基因组位点
  • 使用多重置换扩增反应获得可靠结果
  • 扩增获得的DNA适用于多种下游应用
  • 长期储存不会导致DNA降解

REPLI-g Mini Kit提供优化的试剂，利用多重置换扩增（MDA）技术，对微量或珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增（WGA）。50 μl反应体积的常规DNA产量为10 μg，产物的平均长度长于10 kb（在2 kb至100 kb之间）。独特的REPLI-g技术能够从多种类型的微量或珍贵样本中高度均一的进行全基因组扩增，起始样本包括纯化后基因组DNA、新鲜血液或或干 血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织或细胞。该方法可便利、准确的扩增基因组DNA，得到的DNA可即用于无需标记的多种下游应用，无需进行纯化或定量检测。与 基于PCR的全基因组扩增技术相比，这种方法的无错配率提高了1000倍，避免出现假阴性或假阳性结果。

原理

独特的REPLI-g技术使用创新的高保真酶Phi29聚合酶，利用多重置换扩增（MDA）技术扩增复杂的基因组DNA，并结合温和的碱变性， 均一的扩增基因组位点。REPLI-g Mini Kit的常规产量为10 µg，如需更多产量，可使用REPLI-g Midi Kit；因为这两个试剂盒的实验方案相同，反应体积也相同。反应体系构建十分简便，仅需约15分钟的手动操作时间，因此REPLI-g技术使用简便、可 靠，适用于对少量或珍贵的样本进行完全、均一的扩增。

扩增原理

REPLI-g利用等温基因组扩增，即多重置换扩增（MDA）技术：随机引物与变性DNA结合，在等温环境中，在Phi29聚合酶的作用下，进行置换合成反应。每个置换的单链作为模板，与引物结合，扩增生成高产量的DNA（参见Schematic representation of REPLI-g amplification）。Phi 29聚合酶为噬菌体衍生酶，具有3’→5’外切酶活性，准确性为Taq DNA聚合酶的1000倍。Phi29聚合酶与独特的REPLI-g缓冲液体系相配合，能够轻松的打开DNA的二级结构，如发卡结构，所以可确保在扩增过程中，聚合酶正常发挥作用。因此该技术生成的DNA片段长度可达100 kb，没有序列偏差（参见Unbiased amplification with Phi29 polymerase）。

DNA的碱变性

在酶扩增前，必须使基因组DNA变性，这通常是通过高温孵育、或在强碱性条件下进行的。REPLI-g Mini Kit采用温和的碱性环境孵育，使DNA变性，而片段化程度低，突变少。由此扩增获得的DNA十分完整，扩增的片段长，覆盖所有基因组位点和序列。使用 REPLI-g Mini Kit能够获得可靠的结果，确保在下游应用中不出现假阳性或假阴性结果。采用热变性的WGA技术会损伤模板DNA，导致扩增结果不准确（参见Effect of heat and alkaline denaturation on loci representation）。

操作流程

便利的单管操作

REPLI-g Mini Kit通过简便、高效的方法从纯化的少量基因组DNA样本或直接从全血、干血卡、白膜层、组织、培养的细胞中进行准确的全基因组扩增（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。加入裂解缓冲液使样本DNA裂解并变性，之后进行短暂孵育（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。中和后加入预混液（包括REPLI-g Mini DNA Polymerase），在30°C过夜进行等温扩增。REPLI-g扩增获得的DNA刻在–20°C长期储存（参见Consistent long-term stability）。

选择适合您实验需求的REPLI-g Kit（参见下表）。

表1. 种类丰富的REPLI-g Kits

REPLI-g Mini REPLI-g UltraFast Mini REPLI-g Midi REPLI-g Screening REPLI-g FFPE REPLI-g Mitochondrial DNA
起始样本 纯化后gDNA、血液、细胞 纯化后gDNA、血液、细胞 FFPE组织、FFPE组织中纯化得到的gDNA 纯化后gDNA
起始样本量 >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) Section (1 cm diameter, 10-40 µm thick); >100 ng gDNA >1 ng纯化后gDNA
产量（µg/反应） 10 7–10 40 8 标准产量：≤10，高产量≤40 3–5
反应时间（小时） 10–16 1.5 8–16 12–16 标准产量：4，高产量：10 8
手动操作时间（分钟） 15 15 15 15 40 15
规格 反应管 反应管 反应管 孔板 反应管 反应管

应用

REPLI-g扩增得到的DNA可用于多种下游应用，包括：

  • 使用TagMan引物/探针对的SNP基因分型
  • 基于定量PCR或PCR的突变检测
  • 二代测序
  • STR/微卫星分析
  • Sanger测序
  • RFLP和Southern印迹分析
  • 芯片技术，如比较基因组杂交

REPLI-g Mitochondrial DNA Kit (25) 货号：151023

发表于由

REPLI-g Mitochondrial DNA Kit (25) 货号：151023

REPLI-g Mitochondrial DNA Kit (25)

货　　号：151023

产品规格：25

原  产  地：德国

参考价格：3580 （参考价格，以实际价格为准）

优惠价格：

产品详细信息

REPLI-g Mitochondrial DNA Kit (25)

151023

对人类线粒体DNA进行高度均一的全基因组扩增

  • 克服了分离线粒体DNA耗时的问题
  • 从总DNA中选择性扩增线粒体DNA
  • 扩增得到多达4 µg的高纯度线粒体DNA

REPLI-g Mitochondrial DNA Kit可从DNA样本中选择性扩增线粒体DNA，无需预先分离线粒体DNA。该试剂盒含有DNA聚合酶、缓冲液和试剂，可利用MDA技术从少量样本中的总 DNA中特异性、均一的扩增人类线粒体DNA。这一简便的操作可富集线粒体DNA，且细胞核DNA污染最小，避免进行耗时的线粒体DNA分离纯化，提高了 下游分析的灵敏度。

原理

常见的获得线粒体DNA的限制之一为需要将线粒体DNA与细胞核DNA分离，在需要提高线粒体DNA标记物分析的灵敏度时尤其如此。分离过程涉 及很多耗时的步骤，有可能导致线粒体DNA的损失。REPLI-g Mitochondrial DNA Kit可在含有总DNA的样本中直接扩增获得线粒体DNA，解决了这一问题。

REPLI-g Mitochondrial DNA Kit可快速、高度均一的对线粒体基因组进行全基因组扩增。该方法基于MDA技术，采用新型独特进行性的DNA聚合酶进行等温基因组扩增。REPLI-g DNA Polymerase凭借其活跃的进行性置换反应，可扩增得到100 kb的DNA，无需预先分离DNA。与PCR扩增方法相比，这种方法能很大程度减小 序列偏差和不均一位点的出现。

操作流程
使用REPLI-g Mitochondrial DNA Kit扩增线粒体DNA涉及两个基本的步骤（参见Purified mitochondrial DNA procedure）。首先，将含有总DNA的样本置于REPLI-g mt Reaction Buffer中75°C孵育五分钟，使其变性；通过冷却，使变性停止。然后，加入REPLI-g DNA Polymerase，在33°C开始恒温扩增8小时。

应用

REPLI-g技术扩增获得的线粒体DNA可用于多种下游应用，包括：

  • 基因分型（例如：SNP、缺失、插入）
  • 终点式PCR、real-time PCR 
  • 测序

产品详细信息

REPLI-g Mitochondrial DNA Kit (25)

151023

对人类线粒体DNA进行高度均一的全基因组扩增

  • 克服了分离线粒体DNA耗时的问题
  • 从总DNA中选择性扩增线粒体DNA
  • 扩增得到多达4 µg的高纯度线粒体DNA

REPLI-g Mitochondrial DNA Kit可从DNA样本中选择性扩增线粒体DNA，无需预先分离线粒体DNA。该试剂盒含有DNA聚合酶、缓冲液和试剂，可利用MDA技术从少量样本中的总 DNA中特异性、均一的扩增人类线粒体DNA。这一简便的操作可富集线粒体DNA，且细胞核DNA污染最小，避免进行耗时的线粒体DNA分离纯化，提高了 下游分析的灵敏度。

原理

常见的获得线粒体DNA的限制之一为需要将线粒体DNA与细胞核DNA分离，在需要提高线粒体DNA标记物分析的灵敏度时尤其如此。分离过程涉 及很多耗时的步骤，有可能导致线粒体DNA的损失。REPLI-g Mitochondrial DNA Kit可在含有总DNA的样本中直接扩增获得线粒体DNA，解决了这一问题。

REPLI-g Mitochondrial DNA Kit可快速、高度均一的对线粒体基因组进行全基因组扩增。该方法基于MDA技术，采用新型独特进行性的DNA聚合酶进行等温基因组扩增。REPLI-g DNA Polymerase凭借其活跃的进行性置换反应，可扩增得到100 kb的DNA，无需预先分离DNA。与PCR扩增方法相比，这种方法能很大程度减小 序列偏差和不均一位点的出现。

操作流程
使用REPLI-g Mitochondrial DNA Kit扩增线粒体DNA涉及两个基本的步骤（参见Purified mitochondrial DNA procedure）。首先，将含有总DNA的样本置于REPLI-g mt Reaction Buffer中75°C孵育五分钟，使其变性；通过冷却，使变性停止。然后，加入REPLI-g DNA Polymerase，在33°C开始恒温扩增8小时。

应用

REPLI-g技术扩增获得的线粒体DNA可用于多种下游应用，包括：

  • 基因分型（例如：SNP、缺失、插入）
  • 终点式PCR、real-time PCR 
  • 测序

REPLI-g Mini Kit (25) 货号：150023

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REPLI-g Mini Kit (25) 货号：150023

REPLI-g Mini Kit (25)

货　　号：150023

产品规格：25T

原  产  地：德国

参考价格：2820 （参考价格，以实际价格为准）

优惠价格：

产品详细信息

REPLI-g Mini Kit (25)

150023

对微量或者珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增

  • 扩增获得10 µg DNA，产量稳定
  • 同时扩增多个基因组位点
  • 使用多重置换扩增反应获得可靠结果
  • 扩增获得的DNA适用于多种下游应用
  • 长期储存不会导致DNA降解

REPLI-g Mini Kit提供优化的试剂，利用多重置换扩增（MDA）技术，对微量或珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增（WGA）。50 μl反应体积的常规DNA产量为10 μg，产物的平均长度长于10 kb（在2 kb至100 kb之间）。独特的REPLI-g技术能够从多种类型的微量或珍贵样本中高度均一的进行全基因组扩增，起始样本包括纯化后基因组DNA、新鲜血液或或干 血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织或细胞。该方法可便利、准确的扩增基因组DNA，得到的DNA可即用于无需标记的多种下游应用，无需进行纯化或定量检测。与 基于PCR的全基因组扩增技术相比，这种方法的无错配率提高了1000倍，避免出现假阴性或假阳性结果。

原理

独特的REPLI-g技术使用创新的高保真酶Phi29聚合酶，利用多重置换扩增（MDA）技术扩增复杂的基因组DNA，并结合温和的碱变性， 均一的扩增基因组位点。REPLI-g Mini Kit的常规产量为10 µg，如需更多产量，可使用REPLI-g Midi Kit；因为这两个试剂盒的实验方案相同，反应体积也相同。反应体系构建十分简便，仅需约15分钟的手动操作时间，因此REPLI-g技术使用简便、可 靠，适用于对少量或珍贵的样本进行完全、均一的扩增。

扩增原理

REPLI-g利用等温基因组扩增，即多重置换扩增（MDA）技术：随机引物与变性DNA结合，在等温环境中，在Phi29聚合酶的作用下，进行置换合成反应。每个置换的单链作为模板，与引物结合，扩增生成高产量的DNA（参见Schematic representation of REPLI-g amplification）。Phi 29聚合酶为噬菌体衍生酶，具有3’→5’外切酶活性，准确性为Taq DNA聚合酶的1000倍。Phi29聚合酶与独特的REPLI-g缓冲液体系相配合，能够轻松的打开DNA的二级结构，如发卡结构，所以可确保在扩增过程中，聚合酶正常发挥作用。因此该技术生成的DNA片段长度可达100 kb，没有序列偏差（参见Unbiased amplification with Phi29 polymerase）。

DNA的碱变性

在酶扩增前，必须使基因组DNA变性，这通常是通过高温孵育、或在强碱性条件下进行的。REPLI-g Mini Kit采用温和的碱性环境孵育，使DNA变性，而片段化程度低，突变少。由此扩增获得的DNA十分完整，扩增的片段长，覆盖所有基因组位点和序列。使用 REPLI-g Mini Kit能够获得可靠的结果，确保在下游应用中不出现假阳性或假阴性结果。采用热变性的WGA技术会损伤模板DNA，导致扩增结果不准确（参见Effect of heat and alkaline denaturation on loci representation）。

操作流程

便利的单管操作

REPLI-g Mini Kit通过简便、高效的方法从纯化的少量基因组DNA样本或直接从全血、干血卡、白膜层、组织、培养的细胞中进行准确的全基因组扩增（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。加入裂解缓冲液使样本DNA裂解并变性，之后进行短暂孵育（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。中和后加入预混液（包括REPLI-g Mini DNA Polymerase），在30°C过夜进行等温扩增。REPLI-g扩增获得的DNA刻在–20°C长期储存（参见Consistent long-term stability）。

选择适合您实验需求的REPLI-g Kit（参见下表）。

表1. 种类丰富的REPLI-g Kits

REPLI-g Mini REPLI-g UltraFast Mini REPLI-g Midi REPLI-g Screening REPLI-g FFPE REPLI-g Mitochondrial DNA
起始样本 纯化后gDNA、血液、细胞 纯化后gDNA、血液、细胞 FFPE组织、FFPE组织中纯化得到的gDNA 纯化后gDNA
起始样本量 >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) Section (1 cm diameter, 10-40 µm thick); >100 ng gDNA >1 ng纯化后gDNA
产量（µg/反应） 10 7–10 40 8 标准产量：≤10，高产量≤40 3–5
反应时间（小时） 10–16 1.5 8–16 12–16 标准产量：4，高产量：10 8
手动操作时间（分钟） 15 15 15 15 40 15
规格 反应管 反应管 反应管 孔板 反应管 反应管

应用

REPLI-g扩增得到的DNA可用于多种下游应用，包括：

  • 使用TagMan引物/探针对的SNP基因分型
  • 基于定量PCR或PCR的突变检测
  • 二代测序
  • STR/微卫星分析
  • Sanger测序
  • RFLP和Southern印迹分析
  • 芯片技术，如比较基因组杂交

产品详细信息

REPLI-g Mini Kit (25)

150023

对微量或者珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增

  • 扩增获得10 µg DNA，产量稳定
  • 同时扩增多个基因组位点
  • 使用多重置换扩增反应获得可靠结果
  • 扩增获得的DNA适用于多种下游应用
  • 长期储存不会导致DNA降解

REPLI-g Mini Kit提供优化的试剂，利用多重置换扩增（MDA）技术，对微量或珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增（WGA）。50 μl反应体积的常规DNA产量为10 μg，产物的平均长度长于10 kb（在2 kb至100 kb之间）。独特的REPLI-g技术能够从多种类型的微量或珍贵样本中高度均一的进行全基因组扩增，起始样本包括纯化后基因组DNA、新鲜血液或或干 血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织或细胞。该方法可便利、准确的扩增基因组DNA，得到的DNA可即用于无需标记的多种下游应用，无需进行纯化或定量检测。与 基于PCR的全基因组扩增技术相比，这种方法的无错配率提高了1000倍，避免出现假阴性或假阳性结果。

原理

独特的REPLI-g技术使用创新的高保真酶Phi29聚合酶，利用多重置换扩增（MDA）技术扩增复杂的基因组DNA，并结合温和的碱变性， 均一的扩增基因组位点。REPLI-g Mini Kit的常规产量为10 µg，如需更多产量，可使用REPLI-g Midi Kit；因为这两个试剂盒的实验方案相同，反应体积也相同。反应体系构建十分简便，仅需约15分钟的手动操作时间，因此REPLI-g技术使用简便、可 靠，适用于对少量或珍贵的样本进行完全、均一的扩增。

扩增原理

REPLI-g利用等温基因组扩增，即多重置换扩增（MDA）技术：随机引物与变性DNA结合，在等温环境中，在Phi29聚合酶的作用下，进行置换合成反应。每个置换的单链作为模板，与引物结合，扩增生成高产量的DNA（参见Schematic representation of REPLI-g amplification）。Phi 29聚合酶为噬菌体衍生酶，具有3’→5’外切酶活性，准确性为Taq DNA聚合酶的1000倍。Phi29聚合酶与独特的REPLI-g缓冲液体系相配合，能够轻松的打开DNA的二级结构，如发卡结构，所以可确保在扩增过程中，聚合酶正常发挥作用。因此该技术生成的DNA片段长度可达100 kb，没有序列偏差（参见Unbiased amplification with Phi29 polymerase）。

DNA的碱变性

在酶扩增前，必须使基因组DNA变性，这通常是通过高温孵育、或在强碱性条件下进行的。REPLI-g Mini Kit采用温和的碱性环境孵育，使DNA变性，而片段化程度低，突变少。由此扩增获得的DNA十分完整，扩增的片段长，覆盖所有基因组位点和序列。使用 REPLI-g Mini Kit能够获得可靠的结果，确保在下游应用中不出现假阳性或假阴性结果。采用热变性的WGA技术会损伤模板DNA，导致扩增结果不准确（参见Effect of heat and alkaline denaturation on loci representation）。

操作流程

便利的单管操作

REPLI-g Mini Kit通过简便、高效的方法从纯化的少量基因组DNA样本或直接从全血、干血卡、白膜层、组织、培养的细胞中进行准确的全基因组扩增（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。加入裂解缓冲液使样本DNA裂解并变性，之后进行短暂孵育（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。中和后加入预混液（包括REPLI-g Mini DNA Polymerase），在30°C过夜进行等温扩增。REPLI-g扩增获得的DNA刻在–20°C长期储存（参见Consistent long-term stability）。

选择适合您实验需求的REPLI-g Kit（参见下表）。

表1. 种类丰富的REPLI-g Kits

REPLI-g Mini REPLI-g UltraFast Mini REPLI-g Midi REPLI-g Screening REPLI-g FFPE REPLI-g Mitochondrial DNA
起始样本 纯化后gDNA、血液、细胞 纯化后gDNA、血液、细胞 FFPE组织、FFPE组织中纯化得到的gDNA 纯化后gDNA
起始样本量 >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) Section (1 cm diameter, 10-40 µm thick); >100 ng gDNA >1 ng纯化后gDNA
产量（µg/反应） 10 7–10 40 8 标准产量：≤10，高产量≤40 3–5
反应时间（小时） 10–16 1.5 8–16 12–16 标准产量：4，高产量：10 8
手动操作时间（分钟） 15 15 15 15 40 15
规格 反应管 反应管 反应管 孔板 反应管 反应管

应用

REPLI-g扩增得到的DNA可用于多种下游应用，包括：

  • 使用TagMan引物/探针对的SNP基因分型
  • 基于定量PCR或PCR的突变检测
  • 二代测序
  • STR/微卫星分析
  • Sanger测序
  • RFLP和Southern印迹分析
  • 芯片技术，如比较基因组杂交

REPLI-g Midi Kit (25) 货号：150043

发表于由

REPLI-g Midi Kit (25) 货号：150043

REPLI-g Midi Kit (25)

货　　号：150043

产品规格：25T

原  产  地：德国

参考价格：7530 （参考价格，以实际价格为准）

优惠价格：

产品详细信息

REPLI-g Midi Kit (25)

150043

对微量或者珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增

  • 扩增获得40 µg DNA，产量稳定
  • 同时扩增多个基因组位点
  • 使用多重置换扩增反应获得可靠结果
  • 扩增获得的DNA适用于多种下游应用
  • 长期储存不会导致DNA降解

REPLI-g Midi Kit提供优化的试剂，利用多重置换扩增（MDA）技术，对微量或珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增（WGA）。50 μl反应体积的常规DNA产量为40 μg，产物的平均长度长于10 kb（在2 kb至100 kb之间）。独特的REPLI-g技术能够从多种类型的微量或珍贵样本中高度均一的进行全基因组扩增，起始样本包括纯化后基因组DNA、新鲜血液或或干 血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织或细胞。该方法可便利、准确的扩增基因组DNA，得到的DNA可即用于无需标记的多种下游应用，无需进行纯化或定量检测。与 基于PCR的全基因组扩增技术相比，这种方法的无错配率提高了1000倍，避免出现假阴性或假阳性结果。

原理

独特的REPLI-g技术使用创新的高保真酶Phi29聚合酶，利用多重置换扩增（MDA）技术扩增复杂的基因组DNA， 并结合温和的碱变性，均一的扩增基因组位点。REPLI-g Mini Kit的常规产量为10 µg，如需更多产量，可使用REPLI-g Midi Kit；因为这两个试剂盒的实验方案相同，反应体积也相同。反应体系构建十分简便，仅需约15分钟的手动操作时间，因此REPLI-g技术使用简便、可 靠，适用于对少量或珍贵的样本进行完全、均一的扩增。

扩增原理

REPLI-g利用等温基因组扩增，即多重置换扩增（MDA）技术：随机引物与变性DNA结合，在等温环境中，在Phi29聚合酶的作用下，进行置换合成反应。每个置换的单链作为模板，与引物结合，扩增生成高产量的DNA（参见Schematic representation of REPLI-g amplification）。Phi 29聚合酶为噬菌体衍生酶，具有3’→5’外切酶活性，准确性为Taq DNA聚合酶的1000倍。Phi29聚合酶与独特的REPLI-g缓冲液体系相配合，能够轻松的打开DNA的二级结构，如发卡结构，所以可确保在扩增过程中，聚合酶正常发挥作用。因此该技术生成的DNA片段长度可达100 kb，没有序列偏差（参见Unbiased amplification with Phi29 polymerase）。

DNA的碱变性

在酶扩增前，必须使基因组DNA变性，这通常是通过高温孵育、或在强碱性条件下进行的。REPLI-g Midi Kit采用温和的碱性环境孵育，使DNA变性，而片段化程度低，突变少。由此扩增获得的DNA十分完整，扩增的片段长，覆盖所有基因组位点和序列。使用 REPLI-g Midi Kit能够获得可靠的结果，确保在下游应用中不出现假阳性或假阴性结果。采用热变性的WGA技术会损伤模板DNA，导致扩增结果不准确（参见Effect of heat and alkaline denaturation on loci representation）。

操作流程

便利的单管操作

REPLI-g Midi Kit通过简便、高效的方法从纯化的少量基因组DNA样本或直接从全血、干血卡、白膜层、组织、培养的细胞中进行准确的全基因组扩增（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。加入裂解缓冲液使样本DNA裂解并变性，之后进行短暂孵育（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。中和后加入预混液（包括REPLI-g Mini DNA Polymerase），在30°C过夜进行等温扩增。REPLI-g扩增获得的DNA刻在–20°C长期储存（参见Consistent long-term stability）。

选择适合您实验需求的REPLI-g Kit（参见下表）。

表1. 种类丰富的REPLI-g Kits

REPLI-g Mini REPLI-g UltraFast Mini REPLI-g Midi REPLI-g Screening REPLI-g FFPE REPLI-g Mitochondrial DNA
起始样本 纯化后gDNA、血液、细胞 纯化后gDNA、血液、细胞 FFPE组织、FFPE组织中纯化得到的gDNA 纯化后gDNA
起始样本量 >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) Section (1 cm diameter, 10-40 µm thick); >100 ng gDNA >1 ng纯化后gDNA
产量（µg/反应） 10 7–10 40 8 标准产量：≤10，高产量≤40 3–5
反应时间（小时） 10–16 1.5 8–16 12–16 标准产量：4，高产量：10 8
手动操作时间（分钟） 15 15 15 15 40 15
规格 反应管 反应管 反应管 孔板 反应管 反应管

应用

REPLI-g扩增得到的DNA可用于多种下游应用，包括：

  • 使用TagMan引物/探针对的SNP基因分型
  • 基于定量PCR或PCR的突变检测
  • 二代测序
  • STR/微卫星分析
  • Sanger测序
  • RFLP和Southern印迹分析
  • 芯片技术，如比较基因组杂交

产品详细信息

REPLI-g Midi Kit (25)

150043

对微量或者珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增

  • 扩增获得40 µg DNA，产量稳定
  • 同时扩增多个基因组位点
  • 使用多重置换扩增反应获得可靠结果
  • 扩增获得的DNA适用于多种下游应用
  • 长期储存不会导致DNA降解

REPLI-g Midi Kit提供优化的试剂，利用多重置换扩增（MDA）技术，对微量或珍贵样本进行高度均一的全基因组扩增（WGA）。50 μl反应体积的常规DNA产量为40 μg，产物的平均长度长于10 kb（在2 kb至100 kb之间）。独特的REPLI-g技术能够从多种类型的微量或珍贵样本中高度均一的进行全基因组扩增，起始样本包括纯化后基因组DNA、新鲜血液或或干 血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织或细胞。该方法可便利、准确的扩增基因组DNA，得到的DNA可即用于无需标记的多种下游应用，无需进行纯化或定量检测。与 基于PCR的全基因组扩增技术相比，这种方法的无错配率提高了1000倍，避免出现假阴性或假阳性结果。

原理

独特的REPLI-g技术使用创新的高保真酶Phi29聚合酶，利用多重置换扩增（MDA）技术扩增复杂的基因组DNA， 并结合温和的碱变性，均一的扩增基因组位点。REPLI-g Mini Kit的常规产量为10 µg，如需更多产量，可使用REPLI-g Midi Kit；因为这两个试剂盒的实验方案相同，反应体积也相同。反应体系构建十分简便，仅需约15分钟的手动操作时间，因此REPLI-g技术使用简便、可 靠，适用于对少量或珍贵的样本进行完全、均一的扩增。

扩增原理

REPLI-g利用等温基因组扩增，即多重置换扩增（MDA）技术：随机引物与变性DNA结合，在等温环境中，在Phi29聚合酶的作用下，进行置换合成反应。每个置换的单链作为模板，与引物结合，扩增生成高产量的DNA（参见Schematic representation of REPLI-g amplification）。Phi 29聚合酶为噬菌体衍生酶，具有3’→5’外切酶活性，准确性为Taq DNA聚合酶的1000倍。Phi29聚合酶与独特的REPLI-g缓冲液体系相配合，能够轻松的打开DNA的二级结构，如发卡结构，所以可确保在扩增过程中，聚合酶正常发挥作用。因此该技术生成的DNA片段长度可达100 kb，没有序列偏差（参见Unbiased amplification with Phi29 polymerase）。

DNA的碱变性

在酶扩增前，必须使基因组DNA变性，这通常是通过高温孵育、或在强碱性条件下进行的。REPLI-g Midi Kit采用温和的碱性环境孵育，使DNA变性，而片段化程度低，突变少。由此扩增获得的DNA十分完整，扩增的片段长，覆盖所有基因组位点和序列。使用 REPLI-g Midi Kit能够获得可靠的结果，确保在下游应用中不出现假阳性或假阴性结果。采用热变性的WGA技术会损伤模板DNA，导致扩增结果不准确（参见Effect of heat and alkaline denaturation on loci representation）。

操作流程

便利的单管操作

REPLI-g Midi Kit通过简便、高效的方法从纯化的少量基因组DNA样本或直接从全血、干血卡、白膜层、组织、培养的细胞中进行准确的全基因组扩增（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。加入裂解缓冲液使样本DNA裂解并变性，之后进行短暂孵育（参见REPLI-g Mini and Midi procedure）。中和后加入预混液（包括REPLI-g Mini DNA Polymerase），在30°C过夜进行等温扩增。REPLI-g扩增获得的DNA刻在–20°C长期储存（参见Consistent long-term stability）。

选择适合您实验需求的REPLI-g Kit（参见下表）。

表1. 种类丰富的REPLI-g Kits

REPLI-g Mini REPLI-g UltraFast Mini REPLI-g Midi REPLI-g Screening REPLI-g FFPE REPLI-g Mitochondrial DNA
起始样本 纯化后gDNA、血液、细胞 纯化后gDNA、血液、细胞 FFPE组织、FFPE组织中纯化得到的gDNA 纯化后gDNA
起始样本量 >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) >10 ng gDNA, 0.5 µl blood or cells (>600 cells/µl) Section (1 cm diameter, 10-40 µm thick); >100 ng gDNA >1 ng纯化后gDNA
产量（µg/反应） 10 7–10 40 8 标准产量：≤10，高产量≤40 3–5
反应时间（小时） 10–16 1.5 8–16 12–16 标准产量：4，高产量：10 8
手动操作时间（分钟） 15 15 15 15 40 15
规格 反应管 反应管 反应管 孔板 反应管 反应管

应用

REPLI-g扩增得到的DNA可用于多种下游应用，包括：

  • 使用TagMan引物/探针对的SNP基因分型
  • 基于定量PCR或PCR的突变检测
  • 二代测序
  • STR/微卫星分析
  • Sanger测序
  • RFLP和Southern印迹分析
  • 芯片技术，如比较基因组杂交

REPLI-g UltraFast Mini Kit (25)基因组扩增试剂盒 货号：150033

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REPLI-g UltraFast Mini Kit (25)基因组扩增试剂盒 货号：150033

REPLI-g UltraFast Mini Kit (25)基因组扩增试剂盒

货　　号：150033

产品规格：25T

原  产  地：德国

参考价格：3100 （参考价格，以实际价格为准）

优惠价格：

产品详细信息

REPLI-g UltraFast Mini Kit (25)基因组扩增试剂盒

150033  25T

用于从珍贵或少量样本中超快速，高度均一地进行全基因组扩增
快速全基因组扩增，仅需1–1.5小时
获得无限量DNA适合多种下游应用
从各种起始样本中进行高重复性扩增
高度稳定的DNA适合长期储存

基因组DNA量不足以进行基因组分析，这一问题可通过样本内全基因组DNA扩增解决。REPLI-g UltraFast Kit包含REPLI-g UltraFast DNA Polymerase，该聚合酶可在60–90分钟内高度均一、正确的对少量样本进行全基因组扩增，通常20 μl反应体系产量可达7 μg。起始样本可以是基因组DNA、新鲜或干血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织和培养细胞等。扩增得到的DNA可即用于多种基因分析。

DNA扩增产量高。
使用REPLI-g UltraFast Mini Kit对基因组DNA样本（每个10 ng）和无模板对照（NTC）样本（不含模板DNA）进行扩增，不同时间后测定DNA产量。扩增60分钟后的平均产量是7 µg，扩增90分钟后平均产量是10–13 µg。45分钟后即可获得多至5 µg DNA，可快速用于下游基因分析。在无模板对照反应中未检测到DNA。

原理

用于基因组分析的基因组DNA量通常十分有限。全基因组扩增技术通过对样本中的所有DNA进行全基因组扩增，为下游应用提供足量的DNA，克服这一问题。REPLI-g UltraFast技术可高度均一的进行全基因组扩增，序列偏差小。该方法基于MDA技术，采用独特的DNA聚合酶进行等温基因组扩增，可在较短时间内扩增得到长达100 kb的DNA产物，避免了基于PCR的扩增方法中常见的高序列偏差。此外，独特的碱性变性缓冲液确保了基因组DNA的温和变性，避免热变性导致的模板DNA片段化。因此可确保在下游应用中获得更加灵敏、更加可靠的结果。
操作流程
使用REPLI-g UltraFast Mini Kit进行全基因组扩增需要3个基本步骤。首先，对样本（10 ng纯化的基因组DNA、0.5 µl全血或300个组织培养细胞）进行温和的碱变性，避免模板DNA片段化。然后中和样本，加入REPLI-g UltraFast DNA Polymerase于30°C孵育。60分钟后可获得产物，扩增得到的DNA无需纯化，可即用于下游应用。

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产品详细信息

REPLI-g UltraFast Mini Kit (25)基因组扩增试剂盒

150033  25T

用于从珍贵或少量样本中超快速，高度均一地进行全基因组扩增
快速全基因组扩增，仅需1–1.5小时
获得无限量DNA适合多种下游应用
从各种起始样本中进行高重复性扩增
高度稳定的DNA适合长期储存

基因组DNA量不足以进行基因组分析，这一问题可通过样本内全基因组DNA扩增解决。REPLI-g UltraFast Kit包含REPLI-g UltraFast DNA Polymerase，该聚合酶可在60–90分钟内高度均一、正确的对少量样本进行全基因组扩增，通常20 μl反应体系产量可达7 μg。起始样本可以是基因组DNA、新鲜或干血、口腔拭子、新鲜或冷冻组织和培养细胞等。扩增得到的DNA可即用于多种基因分析。

DNA扩增产量高。
使用REPLI-g UltraFast Mini Kit对基因组DNA样本（每个10 ng）和无模板对照（NTC）样本（不含模板DNA）进行扩增，不同时间后测定DNA产量。扩增60分钟后的平均产量是7 µg，扩增90分钟后平均产量是10–13 µg。45分钟后即可获得多至5 µg DNA，可快速用于下游基因分析。在无模板对照反应中未检测到DNA。

原理

用于基因组分析的基因组DNA量通常十分有限。全基因组扩增技术通过对样本中的所有DNA进行全基因组扩增，为下游应用提供足量的DNA，克服这一问题。REPLI-g UltraFast技术可高度均一的进行全基因组扩增，序列偏差小。该方法基于MDA技术，采用独特的DNA聚合酶进行等温基因组扩增，可在较短时间内扩增得到长达100 kb的DNA产物，避免了基于PCR的扩增方法中常见的高序列偏差。此外，独特的碱性变性缓冲液确保了基因组DNA的温和变性，避免热变性导致的模板DNA片段化。因此可确保在下游应用中获得更加灵敏、更加可靠的结果。
操作流程
使用REPLI-g UltraFast Mini Kit进行全基因组扩增需要3个基本步骤。首先，对样本（10 ng纯化的基因组DNA、0.5 µl全血或300个组织培养细胞）进行温和的碱变性，避免模板DNA片段化。然后中和样本，加入REPLI-g UltraFast DNA Polymerase于30°C孵育。60分钟后可获得产物，扩增得到的DNA无需纯化，可即用于下游应用。

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