miScript PreAMP PCR Kit (12) 货号:331451

miScript PreAMP PCR Kit (12) 货号:331451

miScript PreAMP PCR Kit (12)

货  号:331451

产品规格:12

原  产  地:德国

参考价格:2810 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

miScript PreAMP PCR Kit (12)

331451

Real-time PCR分析miRNA之前,预扩增从含少量RNA的样本中获得的cDNA

  • 有限的RNA进行miRNA表达分析的突破技术
  • 无偏差、可重复性结果
  • 可靠的工作流程
  • 完全整合入miScript PCR System工作流程

miScript PreAMP PCR Kit能够预扩增含少量RNA的起始样本,用于miScript PCR System miRNA的定量。miScript PreAMP PCR Kit使用多功能的、基于PCR的预扩增技术,在一个反应中预扩增400个miRNA特异性cDNA靶点。miScript PreAMP PCR Kit配合miScript PreAMP Primer Mixes,能够准确而全面对10 ng总RNA进行表达分析。10 ng的合成cDNA可以作为10个预扩增反应的模板。这样就提供了足够的模板用于多种Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays或多种重复的miRNome miScript miRNA PCR Array,取决于使用的miScript PreAMP Primer Mix。

原理

miScript PCR System配合SYBR® Green real-time PCR能够灵敏、特异性的进行miRNA定量和分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA和后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。miScript PreAMP PCR Kit是miScript PCR System的一部分,使得研究者能够使用非常有限量的起始RNA进行miRNA分析实验(参见Janas, M.M. et al. (2012) Reduced Expression of Ribosomal Proteins Relieves MicroRNA-Mediated Repression. Molecular Cell 46, 171.)。这对RNA含量较少的样本是非常必要的,如体液、福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本以及细胞量较少的样本,如激光捕获显微切割(LCM) 样本、流式分选细胞、循环肿瘤细胞和细针穿刺活检样本额。小样本中获得的少量RNA通常不足够进行可靠的miRNA分析实验,即使使用如real- time RT-PCR等灵敏的技术。

miScript PreAMP PCR Kit配合miScript PreAMP Primer Mixes能够对10 ng总RNA进行准确全面地表达分析,是一项重大的技术突破。10 ng的合成cDNA可以作为10个预扩增反应的模板。这样就提供了足够的模板用于多种Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays或多种重复的miRNome miScript miRNA PCR Array,取决于使用的miScript PreAMP Primer Mix。miScript PreAMP PCR Kit使用多功能的、基于PCR的预扩增技术,在一个反应中预扩增400个miRNA特异性cDNA靶点。一般情况下,不论是96-plex或384- plex反应都能扩增2000–4000倍。

操作流程

少量RNA样本获得miRNA表达谱需要3个步骤:使用miScript II RT Kit进行逆转录,使用miScript PreAMP PCR Kit和miScript PreAMP Primer Mix进行预扩增,以及使用相应的miScript miRNA PCR Array和miScript SYBR Green PCR Kit进行real-time PCR。将miScript PreAMP PCR Kit和miScript PreAMP Primer Mix的预扩增整合入miScript PCR System miRNA表达谱的工作流程,确保了实验方案的可靠性和结果的可靠性和可重复性。

miScript PreAMP Primer Mixes适用于所有miScript miRNA PCR Arrays。也可使用miScript PreAMP PCR Kit配合25个miScript Primer Assays混合液进行预扩增。

预扩增质控

miScript PreAMP PCR Kit包括4个miScript Primer Assays用于预扩增质控实验,用来检验预扩增的cDNA。下表列出了质控和它们的作用。如需获得更多的详细信息,请参考miScript PreAMP Handbook

质控 作用
miR-16 miScript Primer Assay 确定预扩增cDNA的优化稀释因子,如果不知道模板的起始量
SNORD95 miScript Primer Assay 使用相对定量∆∆CT法将组织和细胞样本的数据标准
确定预扩增cDNA的优化稀释因子,如果不知道模板的起始量,且无miR-16
C. elegans miR-39 miScript Primer Assay 测量miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control(如果纯化过程中加入),用于确定血清和血浆样本的回收率
miRTC miScript Primer Assay 评估逆转录效率

应用

miScript PreAMP PCR Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA的定量和谱分析
  • 从血清或血浆中发现生物标记物

产品详细信息

miScript PreAMP PCR Kit (12)

331451

Real-time PCR分析miRNA之前,预扩增从含少量RNA的样本中获得的cDNA

  • 有限的RNA进行miRNA表达分析的突破技术
  • 无偏差、可重复性结果
  • 可靠的工作流程
  • 完全整合入miScript PCR System工作流程

miScript PreAMP PCR Kit能够预扩增含少量RNA的起始样本,用于miScript PCR System miRNA的定量。miScript PreAMP PCR Kit使用多功能的、基于PCR的预扩增技术,在一个反应中预扩增400个miRNA特异性cDNA靶点。miScript PreAMP PCR Kit配合miScript PreAMP Primer Mixes,能够准确而全面对10 ng总RNA进行表达分析。10 ng的合成cDNA可以作为10个预扩增反应的模板。这样就提供了足够的模板用于多种Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays或多种重复的miRNome miScript miRNA PCR Array,取决于使用的miScript PreAMP Primer Mix。

原理

miScript PCR System配合SYBR® Green real-time PCR能够灵敏、特异性的进行miRNA定量和分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA和后续的real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。miScript PreAMP PCR Kit是miScript PCR System的一部分,使得研究者能够使用非常有限量的起始RNA进行miRNA分析实验(参见Janas, M.M. et al. (2012) Reduced Expression of Ribosomal Proteins Relieves MicroRNA-Mediated Repression. Molecular Cell 46, 171.)。这对RNA含量较少的样本是非常必要的,如体液、福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本以及细胞量较少的样本,如激光捕获显微切割(LCM) 样本、流式分选细胞、循环肿瘤细胞和细针穿刺活检样本额。小样本中获得的少量RNA通常不足够进行可靠的miRNA分析实验,即使使用如real- time RT-PCR等灵敏的技术。

miScript PreAMP PCR Kit配合miScript PreAMP Primer Mixes能够对10 ng总RNA进行准确全面地表达分析,是一项重大的技术突破。10 ng的合成cDNA可以作为10个预扩增反应的模板。这样就提供了足够的模板用于多种Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays或多种重复的miRNome miScript miRNA PCR Array,取决于使用的miScript PreAMP Primer Mix。miScript PreAMP PCR Kit使用多功能的、基于PCR的预扩增技术,在一个反应中预扩增400个miRNA特异性cDNA靶点。一般情况下,不论是96-plex或384- plex反应都能扩增2000–4000倍。

操作流程

少量RNA样本获得miRNA表达谱需要3个步骤:使用miScript II RT Kit进行逆转录,使用miScript PreAMP PCR Kit和miScript PreAMP Primer Mix进行预扩增,以及使用相应的miScript miRNA PCR Array和miScript SYBR Green PCR Kit进行real-time PCR。将miScript PreAMP PCR Kit和miScript PreAMP Primer Mix的预扩增整合入miScript PCR System miRNA表达谱的工作流程,确保了实验方案的可靠性和结果的可靠性和可重复性。

miScript PreAMP Primer Mixes适用于所有miScript miRNA PCR Arrays。也可使用miScript PreAMP PCR Kit配合25个miScript Primer Assays混合液进行预扩增。

预扩增质控

miScript PreAMP PCR Kit包括4个miScript Primer Assays用于预扩增质控实验,用来检验预扩增的cDNA。下表列出了质控和它们的作用。如需获得更多的详细信息,请参考miScript PreAMP Handbook

质控 作用
miR-16 miScript Primer Assay 确定预扩增cDNA的优化稀释因子,如果不知道模板的起始量
SNORD95 miScript Primer Assay 使用相对定量∆∆CT法将组织和细胞样本的数据标准
确定预扩增cDNA的优化稀释因子,如果不知道模板的起始量,且无miR-16
C. elegans miR-39 miScript Primer Assay 测量miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control(如果纯化过程中加入),用于确定血清和血浆样本的回收率
miRTC miScript Primer Assay 评估逆转录效率

应用

miScript PreAMP PCR Kit作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 成熟miRNA的定量和谱分析
  • 从血清或血浆中发现生物标记物

RASAL2 Antibody (Center) 货号:AP12987c

RASAL2 Antibody (Center) 货号:AP12987c

RASAL2 Antibody (Center)

货  号:AP12987c

产品规格:100UL

原  产  地:USA

参考价格:1100 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

RASAL2 Antibody (Center) – Product info

Application WB
Primary Accession Q9UJF2
Other Accession NP_004832.1
Reactivity Human
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 128558 Da

RASAL2 Antibody (Center) – Additional info

Gene ID 9462
Other Names
RASAL2; NGAP; Ras GTPase-activating protein nGAP; RAS protein activator-like 2
Target/Specificity
This RASAL2 antibody is generated from rabbits immunized with a KLH conjugated synthetic peptide between 675-703 amino acids from the Central region of human RASAL2.
Dilution
WB~~1:1000

产品详细信息

RASAL2 Antibody (Center) – Product info

Application WB
Primary Accession Q9UJF2
Other Accession NP_004832.1
Reactivity Human
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 128558 Da

RASAL2 Antibody (Center) – Additional info

Gene ID 9462
Other Names
RASAL2; NGAP; Ras GTPase-activating protein nGAP; RAS protein activator-like 2
Target/Specificity
This RASAL2 antibody is generated from rabbits immunized with a KLH conjugated synthetic peptide between 675-703 amino acids from the Central region of human RASAL2.
Dilution
WB~~1:1000

virotype SBV RT-PCR Kit (24) 货号:281603

virotype SBV RT-PCR Kit (24) 货号:281603

virotype SBV RT-PCR Kit (24)

货  号:281603

产品规格:24

原  产  地:德国

参考价格:5290 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

virotype SBV RT-PCR Kit (24)

281603

用于检测反刍动物样本中的Schmallenberg病毒

  • 快速、特异性的检测Schmallenberg病毒RNA
  • 易用性反应混合液含有对照
  • 2小时内获完成RT-PCR
  • 可与其他virotype RT-PCR试剂在一台PCR仪上一同进行反应
virotype SBV RT-PCR Kit能够安全的检测反刍动物样本中的Schmallenberg病毒(SBV)。该试剂盒含有real-time RT-PCR一次反应的即用型预混液所需的所有试剂。适用于血清、血液、精液、胎粪拭子样本、和单独或混合的血液、血清、组织样本、以及来自细胞培养液上 清液的样本。

原理
Schmallenberg病毒(SBV)是有包膜的单链RNA病毒,主要通过蠓传播。该real-time RT-PCR试剂盒可检测SBV的RNA。RT-PCR扩增病原体基因组的某一特定区域。是灵敏、特异性的病原体检测方法。

Real-time RT-PCR对病毒RNA进行逆转录,之后通过PCR扩增cDNA,通过荧光染料检测扩增产物。这些染料通常与扩增产物上特异性结合的寡核苷酸探针结合。在PCR反应中监测荧光强度,即可实时监测到产物生成量,而无需打开管盖。

操作流程
该试剂盒含有即用型预混液,其中有检测SBV RNA所需的所有试剂,以及阳性对照和阴性对照。使用该试剂盒进行检测,逆转录和PCR反应在同一单管中进行,减少了污染风险。

使用相应的样本制备试剂盒从样本材料(血清、血液、组织、精液、胎粪拭子或细胞培养液上清液)中分离RNA。将分离出的RNA用于RT-PCR反应。

应用
virotype SBV RT-PCR Kit能够检测反刍动物样本中的Schmallenberg病毒(SBV)。

产品详细信息

virotype SBV RT-PCR Kit (24)

281603

用于检测反刍动物样本中的Schmallenberg病毒

  • 快速、特异性的检测Schmallenberg病毒RNA
  • 易用性反应混合液含有对照
  • 2小时内获完成RT-PCR
  • 可与其他virotype RT-PCR试剂在一台PCR仪上一同进行反应
virotype SBV RT-PCR Kit能够安全的检测反刍动物样本中的Schmallenberg病毒(SBV)。该试剂盒含有real-time RT-PCR一次反应的即用型预混液所需的所有试剂。适用于血清、血液、精液、胎粪拭子样本、和单独或混合的血液、血清、组织样本、以及来自细胞培养液上 清液的样本。

原理
Schmallenberg病毒(SBV)是有包膜的单链RNA病毒,主要通过蠓传播。该real-time RT-PCR试剂盒可检测SBV的RNA。RT-PCR扩增病原体基因组的某一特定区域。是灵敏、特异性的病原体检测方法。

Real-time RT-PCR对病毒RNA进行逆转录,之后通过PCR扩增cDNA,通过荧光染料检测扩增产物。这些染料通常与扩增产物上特异性结合的寡核苷酸探针结合。在PCR反应中监测荧光强度,即可实时监测到产物生成量,而无需打开管盖。

操作流程
该试剂盒含有即用型预混液,其中有检测SBV RNA所需的所有试剂,以及阳性对照和阴性对照。使用该试剂盒进行检测,逆转录和PCR反应在同一单管中进行,减少了污染风险。

使用相应的样本制备试剂盒从样本材料(血清、血液、组织、精液、胎粪拭子或细胞培养液上清液)中分离RNA。将分离出的RNA用于RT-PCR反应。

应用
virotype SBV RT-PCR Kit能够检测反刍动物样本中的Schmallenberg病毒(SBV)。

KREMEN2 Antibody (Center) 货号:AP13054c

KREMEN2 Antibody (Center) 货号:AP13054c

KREMEN2 Antibody (Center)

货  号:AP13054c

产品规格:100UL

原  产  地:USA

参考价格:1100 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

KREMEN2 Antibody (Center) – Product info

Application WB
Primary Accession Q8NCW0
Other Accession NP_757384.1, NP_078783.1
Reactivity Human
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 48849 Da

KREMEN2 Antibody (Center) – Additional info

Gene ID 79412
Other Names
KREMEN2; KRM2; Kremen protein 2; Dickkopf receptor 2; Kringle domain-containing transmembrane protein 2; Kringle-containing protein marking the eye and the nose
Target/Specificity
This KREMEN2 antibody is generated from rabbits immunized with a KLH conjugated synthetic peptide between 248-276 amino acids from the Central region of human KREMEN2.
Dilution
WB~~1:1000

产品详细信息

KREMEN2 Antibody (Center) – Product info

Application WB
Primary Accession Q8NCW0
Other Accession NP_757384.1, NP_078783.1
Reactivity Human
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 48849 Da

KREMEN2 Antibody (Center) – Additional info

Gene ID 79412
Other Names
KREMEN2; KRM2; Kremen protein 2; Dickkopf receptor 2; Kringle domain-containing transmembrane protein 2; Kringle-containing protein marking the eye and the nose
Target/Specificity
This KREMEN2 antibody is generated from rabbits immunized with a KLH conjugated synthetic peptide between 248-276 amino acids from the Central region of human KREMEN2.
Dilution
WB~~1:1000

HIPK4 Antibody 货号:AP12924a

HIPK4 Antibody 货号:AP12924a

HIPK4 Antibody

货  号:AP12924a

产品规格:100UL

原  产  地:USA

参考价格:1100 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

HIPK4 Antibody – Product info

Application WB, IHC
Primary Accession Q8NE63
Other Accession NP_653286.2
Reactivity Human
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 69425 Da

HIPK4 Antibody – Additional info

Gene ID 147746
Other Names
HIPK4; Homeodomain-interacting protein kinase 4
Target/Specificity
This HIPK4 antibody is generated from rabbits immunized with a recombinant protein from human HIPK4.
Dilution
WB~~1:1000
IHC~~1:10~50

产品详细信息

HIPK4 Antibody – Product info

Application WB, IHC
Primary Accession Q8NE63
Other Accession NP_653286.2
Reactivity Human
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 69425 Da

HIPK4 Antibody – Additional info

Gene ID 147746
Other Names
HIPK4; Homeodomain-interacting protein kinase 4
Target/Specificity
This HIPK4 antibody is generated from rabbits immunized with a recombinant protein from human HIPK4.
Dilution
WB~~1:1000
IHC~~1:10~50

TAGZyme Kit 货号:34300

TAGZyme Kit 货号:34300

TAGZyme Kit

货  号:34300

产品规格:

原  产  地:德国

参考价格:7290 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

TAGZyme Kit

34300

去除蛋白的His标签,这些蛋白固有或含有可诱导DAPase终止位点

  • 高特异性N端外切酶活性,避免内部切割
  • 提供去除His标签的完整解决方案
  • 在37°C,只需30分钟即可去除95%以上的标签
  • 高纯度的最终产品
  • 消减Ni-NTA色谱层析,去除所有污染物

TAGZyme Kit包含TAGZyme Enzymes、试剂和Ni-NTA Agarose,能高特异性、高效率地去除至多10 mg His-tagged蛋白的His标签。此试剂盒可用于去除蛋白的His标签,这些蛋白自身含有DAPase终止位点(使用TAGZyme pQE-2载体表达,使用TAGZyme DAPase Enzyme处理)或含有工程设计的谷氨酰胺终止位点(使用TAGZyme pQE-1载体表达,使用TAGZyme DAPase、Qcyclase和pGAPase Enzymes处理)。选择合适的载体,请联系QIAGEN技术专家或当地经销商。

原理

His-tagged重组蛋白是研究蛋白结构和功能的重要工具。His标签很小并具有较低的免疫原性,使它通常不需要被去除。但是,不含有载体源氨基酸的蛋白产物更适用于一些应用,例如通过X射线或NMR进行结构研究,或生产具有治疗效果的药物。

TAGZyme体系从融合蛋白上去除N端的His标签,具有很高的特异性和效率。DAPase酶用于切割纯化的His-tagged蛋白N端的肽(参见His-tag removal。 当酶切割到“终止位点”时,消化就会停止,终止位点是一个不能作为底物的氨基酸基序(见表“DAPase 终止位点”)。如果重组蛋白自身不含有固有DAPase终止位点,可通过在载体上插入谷氨酰胺密码子来引入。在表达的蛋白中,谷氨酰胺变成焦谷氨酸,成为 DAPase的终止位点。

DAPase终止位点
氨基酸 DAPase终止位点 (↓) 序列*
 赖氨酸(Lys, K)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa Lys-Xaa…
 精氨酸(Arg, R)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Arg-Xaa…
 脯氨酸(Pro, P)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Xaa-Xaa-Pro-Xaa…
 脯氨酸(Pro, P)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Xaa-Pro-Xaa-Xaa…
 谷氨酰胺(Gln, Q)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Gln-Xaa…
 异亮氨酸(Ile, I)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Xaa-Ile-Xaa-Xaa…
*天然的DAPase终止位点(↓)是二肽内指定位点紧接的氨基酸(被切掉的二肽标有下划线)。
† 在过量Qcyclase.Enzyme存在条件下,谷氨酰胺残基变为焦谷氨酸。

操作流程

使用TAGZyme pQE-2载体表达自身含有终止位点的重组蛋白,不管DNA片段插入位点如何,都可完全、有效地去除N端His标签。使用DAPase酶孵育后,反应混合物加入到Ni-NTA基质中进行消减固定金属亲和层析色谱(IMAC)(参见Purification of detagged proteins)。His标签片段和TAGZyme DAPase Enzyme(C-端带有未切割的His标签)与基质结合,在穿透液中可回收到纯化的、不带标签的目的蛋白。

当蛋白自身不含有DAPase终止位点时,可通过表达载体插入谷氨酰胺密码子,从而向蛋白序列中引入终止位点。TAGZyme pQE-1载体可在His标签序列和蛋白序列之间编码一个谷氨酰胺残基,可配合TAGZyme体系发挥作用。谷氨酰胺残基位于His标签后的奇数位位点, 正好在原始蛋白第一个氨基酸之前。使用DAPase酶和过量的Qcyclase酶可去除His标签。通过DAPase酶去除His标签肽后,谷氨酰胺残基 暴露在N端反应液中过量的Qcyclase酶能将N端的谷氨酰胺残基催化形成焦谷氨酸。N端含有焦谷氨酸的肽不能作为DAPase的底物,进一步的切割就 被终止了。反应液进行一轮消减IMAC,His-tagged TAGZyme DAPase和Qcyclase Enzymes就能被去除。在穿透液中可收集到目的蛋白。目的蛋白N端的焦谷氨酸残基可被His-tagged pGAPase酶去除,pGAPase酶能被第二轮消减IMAC去除,在穿透液中即可获得纯化的、无标签的目的蛋白。

应用

TAGZyme体系提供特异性切割、重组试剂的使用以及完全去除污染物,是获得不含His标签蛋白的理想选择,适合的应用包括:

  • 通过NMR或X射线结晶确定蛋白结构
  • 生产具有治疗功能的蛋白

产品详细信息

TAGZyme Kit

34300

去除蛋白的His标签,这些蛋白固有或含有可诱导DAPase终止位点

  • 高特异性N端外切酶活性,避免内部切割
  • 提供去除His标签的完整解决方案
  • 在37°C,只需30分钟即可去除95%以上的标签
  • 高纯度的最终产品
  • 消减Ni-NTA色谱层析,去除所有污染物

TAGZyme Kit包含TAGZyme Enzymes、试剂和Ni-NTA Agarose,能高特异性、高效率地去除至多10 mg His-tagged蛋白的His标签。此试剂盒可用于去除蛋白的His标签,这些蛋白自身含有DAPase终止位点(使用TAGZyme pQE-2载体表达,使用TAGZyme DAPase Enzyme处理)或含有工程设计的谷氨酰胺终止位点(使用TAGZyme pQE-1载体表达,使用TAGZyme DAPase、Qcyclase和pGAPase Enzymes处理)。选择合适的载体,请联系QIAGEN技术专家或当地经销商。

原理

His-tagged重组蛋白是研究蛋白结构和功能的重要工具。His标签很小并具有较低的免疫原性,使它通常不需要被去除。但是,不含有载体源氨基酸的蛋白产物更适用于一些应用,例如通过X射线或NMR进行结构研究,或生产具有治疗效果的药物。

TAGZyme体系从融合蛋白上去除N端的His标签,具有很高的特异性和效率。DAPase酶用于切割纯化的His-tagged蛋白N端的肽(参见His-tag removal。 当酶切割到“终止位点”时,消化就会停止,终止位点是一个不能作为底物的氨基酸基序(见表“DAPase 终止位点”)。如果重组蛋白自身不含有固有DAPase终止位点,可通过在载体上插入谷氨酰胺密码子来引入。在表达的蛋白中,谷氨酰胺变成焦谷氨酸,成为 DAPase的终止位点。

DAPase终止位点
氨基酸 DAPase终止位点 (↓) 序列*
 赖氨酸(Lys, K)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa Lys-Xaa…
 精氨酸(Arg, R)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Arg-Xaa…
 脯氨酸(Pro, P)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Xaa-Xaa-Pro-Xaa…
 脯氨酸(Pro, P)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Xaa-Pro-Xaa-Xaa…
 谷氨酰胺(Gln, Q)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Gln-Xaa…
 异亮氨酸(Ile, I)  Xaa-Xaa…Xaa-Xaa ↓ Xaa-Ile-Xaa-Xaa…
*天然的DAPase终止位点(↓)是二肽内指定位点紧接的氨基酸(被切掉的二肽标有下划线)。
† 在过量Qcyclase.Enzyme存在条件下,谷氨酰胺残基变为焦谷氨酸。

操作流程

使用TAGZyme pQE-2载体表达自身含有终止位点的重组蛋白,不管DNA片段插入位点如何,都可完全、有效地去除N端His标签。使用DAPase酶孵育后,反应混合物加入到Ni-NTA基质中进行消减固定金属亲和层析色谱(IMAC)(参见Purification of detagged proteins)。His标签片段和TAGZyme DAPase Enzyme(C-端带有未切割的His标签)与基质结合,在穿透液中可回收到纯化的、不带标签的目的蛋白。

当蛋白自身不含有DAPase终止位点时,可通过表达载体插入谷氨酰胺密码子,从而向蛋白序列中引入终止位点。TAGZyme pQE-1载体可在His标签序列和蛋白序列之间编码一个谷氨酰胺残基,可配合TAGZyme体系发挥作用。谷氨酰胺残基位于His标签后的奇数位位点, 正好在原始蛋白第一个氨基酸之前。使用DAPase酶和过量的Qcyclase酶可去除His标签。通过DAPase酶去除His标签肽后,谷氨酰胺残基 暴露在N端反应液中过量的Qcyclase酶能将N端的谷氨酰胺残基催化形成焦谷氨酸。N端含有焦谷氨酸的肽不能作为DAPase的底物,进一步的切割就 被终止了。反应液进行一轮消减IMAC,His-tagged TAGZyme DAPase和Qcyclase Enzymes就能被去除。在穿透液中可收集到目的蛋白。目的蛋白N端的焦谷氨酸残基可被His-tagged pGAPase酶去除,pGAPase酶能被第二轮消减IMAC去除,在穿透液中即可获得纯化的、无标签的目的蛋白。

应用

TAGZyme体系提供特异性切割、重组试剂的使用以及完全去除污染物,是获得不含His标签蛋白的理想选择,适合的应用包括:

  • 通过NMR或X射线结晶确定蛋白结构
  • 生产具有治疗功能的蛋白

UBTD1 Antibody 货号:AP12921a

UBTD1 Antibody 货号:AP12921a

UBTD1 Antibody

货  号:AP12921a

产品规格:100UL

原  产  地:USA

参考价格:1100 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

UBTD1 Antibody – Product info

Application WB
Primary Accession Q9HAC8
Other Accession NP_079230.1
Reactivity Human
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 25938 Da

UBTD1 Antibody – Additional info

Gene ID 80019
Other Names
UBTD1; Ubiquitin domain-containing protein 1
Target/Specificity
This UBTD1 antibody is generated from rabbits immunized with a recombinant protein from human UBTD1.
Dilution
WB~~1:1000

产品详细信息

UBTD1 Antibody – Product info

Application WB
Primary Accession Q9HAC8
Other Accession NP_079230.1
Reactivity Human
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 25938 Da

UBTD1 Antibody – Additional info

Gene ID 80019
Other Names
UBTD1; Ubiquitin domain-containing protein 1
Target/Specificity
This UBTD1 antibody is generated from rabbits immunized with a recombinant protein from human UBTD1.
Dilution
WB~~1:1000

AxyPrep Mag 磁珠法石蜡包埋(FFPE)样本DNA-RNA共提取试剂盒 货号:MAG-FFPE-M

AxyPrep Mag 磁珠法石蜡包埋(FFPE)样本DNA-RNA共提取试剂盒 货号:MAG-FFPE-M

AxyPrep Mag 磁珠法石蜡包埋(FFPE)样本DNA-RNA共提取试剂盒

货  号:MAG-FFPE-M

产品规格:96 prep

原  产  地:axygen

参考价格:5683 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

AxyPrep Mag 磁珠法石蜡包埋(FFPE)样本DNA-RNA共提取试剂盒  MAG-FFPE-M

MAG-FFPE-M AxyPrep Mag 磁珠法石蜡包埋(FFPE)样本DNA-RNA共提取试剂盒 96 prep            5,683
MAG-FFPE-L AxyPrep Mag 磁珠法石蜡包埋(FFPE)样本DNA-RNA共提取试剂盒 384 prep           18,861
MAG-T-GDNA-S AxyPrep Mag 磁珠法通用基因组DNA试剂盒 48 prep            1,927
MAG-T-GDNA-M AxyPrep Mag 磁珠法通用基因组DNA试剂盒 384 prep           11,367
MAG-P-S AxyPrep Mag 磁珠法质粒试剂盒 400 prep            8,449
MAG-P-M AxyPrep Mag 磁珠法质粒试剂盒 4000 prep           22,885
MAG-DYECL-5 AxyPrep Mag 磁珠法染料去除试剂盒 800 prep            2,860
MAG-DYECL-50 AxyPrep Mag 磁珠法染料去除试剂盒 5000 prep           15,733
MAG-FRAG-I-5 AxyPrep Mag 磁珠法片段筛选试剂盒-I 4 prep            1,907
MAG-FRAG-I-50 AxyPrep Mag 磁珠法片段筛选试剂盒-I 380 prep            8,582
MAG-FRAG-R-5 AxyPrep Mag 磁珠法片段筛选试剂盒-R 4 prep            1,908
MAG-FRAG-R-50 AxyPrep Mag 磁珠法片段筛选试剂盒-R 350 prep            8,582
MAG-PCR-NM-5 AxyPrep Mag 磁珠法PCR产物标准化试剂盒 5 ml            3,147
MAG-PCR-NM-50 AxyPrep Mag 磁珠法PCR产物标准化试剂盒 2500 prep            9,402
MAG-PCR-CL-5 AxyPrep Mag 磁珠法PCR清洁试剂盒 110 prep            1,830
MAG-PCR-CL-50 AxyPrep Mag 磁珠法PCR清洁试剂盒 1110 prep            8,372
AP-VM-G AxyVac 负压装置(第一代)            1,418
WIP302032-01 96孔制备支架 第二代               168
AP-VM-II AxyVac 负压装置(第二代)            1,260
WIPP02010 48深孔板(4.6ml) 24块/盒,4盒/箱            2,238
WIPP02011 48深孔板(4.6ml)加盖 24块/盒,4盒/箱            1,300
WIPP02170 96孔过滤板 24块/盒,4盒/箱           13,457
WIPP02280 96V型底板(PS) 24块/盒,6盒/箱            3,357
WIPP03140 微量制备管-1 50个/包,130包/箱            6,143
WIPP03150 微量制备管-2 50个/包,130包/箱            8,532
WIPP03150-32 微量制备管-2, 定制 32个/包,150包/箱            6,300
WIPP09010 不干胶片 500片/包,30包/箱           14,175
WIPP09130 96方孔封口硅胶片 24块/包,24包/每箱           14,818
WIPP01020 1.5ml 离心管(L) 50个/包,200包/箱            4,156
WIPP01130 2.0ml 离心管(L) 50个/包,180包/箱            3,769
WIPP01130-64 2.0ml 离心管(L), 定制 64个/包,150包/箱            4,647
WIPP01200 1.5ml螺旋管 500个/包,10包/箱           12,571
WIPP02020 96方孔深板(2.2ml) 加盖 24块/盒,4盒/箱            1,646
WIPP02021 96方孔深板(2.2ml) 24块/盒,4盒/箱            1,379
WIPP02030 96方孔深板(1.6ml) 24块/盒,4盒/箱            1,223
WIPP02210 96孔制备板-1 24块/盒,4盒/箱           14,545
WIPP02240 96孔制备板-2 24块/盒,4盒/箱           15,986
WIPP02330 96V型底板(PP) 24块/盒,8盒/箱            2,787
WIPP03130 制备管 50个/包,130包/箱           11,459
WIPP04011 平底过滤管 50个/包,130包/箱            9,607
WIPP09440 研磨棒 100支/袋, 12袋/箱            1,144

产品详细信息

AxyPrep Mag 磁珠法石蜡包埋(FFPE)样本DNA-RNA共提取试剂盒  MAG-FFPE-M

MAG-FFPE-M AxyPrep Mag 磁珠法石蜡包埋(FFPE)样本DNA-RNA共提取试剂盒 96 prep            5,683
MAG-FFPE-L AxyPrep Mag 磁珠法石蜡包埋(FFPE)样本DNA-RNA共提取试剂盒 384 prep           18,861
MAG-T-GDNA-S AxyPrep Mag 磁珠法通用基因组DNA试剂盒 48 prep            1,927
MAG-T-GDNA-M AxyPrep Mag 磁珠法通用基因组DNA试剂盒 384 prep           11,367
MAG-P-S AxyPrep Mag 磁珠法质粒试剂盒 400 prep            8,449
MAG-P-M AxyPrep Mag 磁珠法质粒试剂盒 4000 prep           22,885
MAG-DYECL-5 AxyPrep Mag 磁珠法染料去除试剂盒 800 prep            2,860
MAG-DYECL-50 AxyPrep Mag 磁珠法染料去除试剂盒 5000 prep           15,733
MAG-FRAG-I-5 AxyPrep Mag 磁珠法片段筛选试剂盒-I 4 prep            1,907
MAG-FRAG-I-50 AxyPrep Mag 磁珠法片段筛选试剂盒-I 380 prep            8,582
MAG-FRAG-R-5 AxyPrep Mag 磁珠法片段筛选试剂盒-R 4 prep            1,908
MAG-FRAG-R-50 AxyPrep Mag 磁珠法片段筛选试剂盒-R 350 prep            8,582
MAG-PCR-NM-5 AxyPrep Mag 磁珠法PCR产物标准化试剂盒 5 ml            3,147
MAG-PCR-NM-50 AxyPrep Mag 磁珠法PCR产物标准化试剂盒 2500 prep            9,402
MAG-PCR-CL-5 AxyPrep Mag 磁珠法PCR清洁试剂盒 110 prep            1,830
MAG-PCR-CL-50 AxyPrep Mag 磁珠法PCR清洁试剂盒 1110 prep            8,372
AP-VM-G AxyVac 负压装置(第一代)            1,418
WIP302032-01 96孔制备支架 第二代               168
AP-VM-II AxyVac 负压装置(第二代)            1,260
WIPP02010 48深孔板(4.6ml) 24块/盒,4盒/箱            2,238
WIPP02011 48深孔板(4.6ml)加盖 24块/盒,4盒/箱            1,300
WIPP02170 96孔过滤板 24块/盒,4盒/箱           13,457
WIPP02280 96V型底板(PS) 24块/盒,6盒/箱            3,357
WIPP03140 微量制备管-1 50个/包,130包/箱            6,143
WIPP03150 微量制备管-2 50个/包,130包/箱            8,532
WIPP03150-32 微量制备管-2, 定制 32个/包,150包/箱            6,300
WIPP09010 不干胶片 500片/包,30包/箱           14,175
WIPP09130 96方孔封口硅胶片 24块/包,24包/每箱           14,818
WIPP01020 1.5ml 离心管(L) 50个/包,200包/箱            4,156
WIPP01130 2.0ml 离心管(L) 50个/包,180包/箱            3,769
WIPP01130-64 2.0ml 离心管(L), 定制 64个/包,150包/箱            4,647
WIPP01200 1.5ml螺旋管 500个/包,10包/箱           12,571
WIPP02020 96方孔深板(2.2ml) 加盖 24块/盒,4盒/箱            1,646
WIPP02021 96方孔深板(2.2ml) 24块/盒,4盒/箱            1,379
WIPP02030 96方孔深板(1.6ml) 24块/盒,4盒/箱            1,223
WIPP02210 96孔制备板-1 24块/盒,4盒/箱           14,545
WIPP02240 96孔制备板-2 24块/盒,4盒/箱           15,986
WIPP02330 96V型底板(PP) 24块/盒,8盒/箱            2,787
WIPP03130 制备管 50个/包,130包/箱           11,459
WIPP04011 平底过滤管 50个/包,130包/箱            9,607
WIPP09440 研磨棒 100支/袋, 12袋/箱            1,144

IL17A Antibody (Center) 货号:AP12918c

IL17A Antibody (Center) 货号:AP12918c

IL17A Antibody (Center)

货  号:AP12918c

产品规格:100UL

原  产  地:USA

参考价格:1100 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

IL17A Antibody (Center) – Product info

Application WB
Primary Accession Q16552
Other Accession Q687Y7, NP_002181.1
Reactivity Human
Predicted Bovine
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 17504 Da

IL17A Antibody (Center) – Additional info

Gene ID 3605
Other Names
IL17A; CTLA8; IL17; Interleukin-17A; Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen 8
Target/Specificity
This IL17A antibody is generated from rabbits immunized with a KLH conjugated synthetic peptide between 61-87 amino acids from the Central region of human IL17A.
Dilution
WB~~1:1000

产品详细信息

IL17A Antibody (Center) – Product info

Application WB
Primary Accession Q16552
Other Accession Q687Y7, NP_002181.1
Reactivity Human
Predicted Bovine
Isotype Rabbit Ig
Calculated MW 17504 Da

IL17A Antibody (Center) – Additional info

Gene ID 3605
Other Names
IL17A; CTLA8; IL17; Interleukin-17A; Cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen 8
Target/Specificity
This IL17A antibody is generated from rabbits immunized with a KLH conjugated synthetic peptide between 61-87 amino acids from the Central region of human IL17A.
Dilution
WB~~1:1000

AxyPrep 血基因组DNA小量试剂盒(酶法) 货号:AP-EMN-BL-GDNA-50

AxyPrep 血基因组DNA小量试剂盒(酶法) 货号:AP-EMN-BL-GDNA-50

AxyPrep 血基因组DNA小量试剂盒(酶法)

货  号:AP-EMN-BL-GDNA-50

产品规格:50 prep

原  产  地:axygen

参考价格:472 (参考价格,以实际价格为准)

优惠价格:

产品详细信息

AxyPrep 血基因组DNA小量试剂盒(酶法)  AP-EMN-BL-GDNA-50

AP-EMN-BL-GDNA-250 AxyPrep 血基因组DNA小量试剂盒(酶法) 250 prep            2,237
AP-EMN-BL-GDNA-50 AxyPrep 血基因组DNA小量试剂盒(酶法) 50 prep               472

产品详细信息

AxyPrep 血基因组DNA小量试剂盒(酶法)  AP-EMN-BL-GDNA-50

AP-EMN-BL-GDNA-250 AxyPrep 血基因组DNA小量试剂盒(酶法) 250 prep            2,237
AP-EMN-BL-GDNA-50 AxyPrep 血基因组DNA小量试剂盒(酶法) 50 prep               472